臺(tái)式色度測定儀測量熒光樣品時(shí),需通過針對性校準(zhǔn)消除熒光效應(yīng)對色度檢測的干擾。熒光樣品受激發(fā)光照射會(huì)發(fā)射額外熒光,導(dǎo)致檢測光強(qiáng)包含色度本身吸收光與熒光發(fā)射光的疊加信號(hào),常規(guī)校準(zhǔn)方法無法消除這種干擾,需建立 “熒光干擾消除 — 基礎(chǔ)校準(zhǔn) — 補(bǔ)償校準(zhǔn)” 的三階校準(zhǔn)體系。 校準(zhǔn)前準(zhǔn)備需聚焦熒光特性適配。選擇與樣品激發(fā)波長匹配的濾光片組合,通常配備 450-500nm 激發(fā)光截止濾光片,避免激發(fā)光直接進(jìn)入檢測系統(tǒng)。準(zhǔn)備經(jīng)認(rèn)證的標(biāo)準(zhǔn)色度溶液(如鉑鈷標(biāo)準(zhǔn)液),同時(shí)準(zhǔn)備無熒光干擾的空白溶液(如超純水)和與樣品熒光特性相似的熒光空白液(不含色度物質(zhì)但含熒光基質(zhì))。校準(zhǔn)環(huán)境需控制光源穩(wěn)定性,關(guān)閉周圍強(qiáng)光源,檢測倉內(nèi)壁張貼啞光黑色吸光材料,減少熒光反射干擾。比色皿選用低熒光石英材質(zhì),使用前用熒光空白液清洗 3 次,避免殘留熒光物質(zhì)。 熒光干擾消除校準(zhǔn)是核心步驟。將熒光空白液注入比色皿,放入檢測倉,在儀器操作界面選擇 “熒光校正” 模式,設(shè)定激發(fā)光波長(與樣品熒光激發(fā)波長一致)和熒光發(fā)射波長(樣品主要發(fā)射波長)。儀器會(huì)自動(dòng)測量熒光空白液的發(fā)射光強(qiáng)度,記錄熒光基線值并存儲(chǔ)為干擾補(bǔ)償參數(shù)。若樣品熒光強(qiáng)度隨時(shí)間衰減,需在每次測量前重新進(jìn)行熒光空白校準(zhǔn),確保補(bǔ)償參數(shù)時(shí)效性。此步驟需重復(fù) 3 次,取熒光基線平均值作為最終補(bǔ)償值,偏差需≤±2%。 基礎(chǔ)色度校準(zhǔn)需疊加熒光補(bǔ)償。零點(diǎn)校準(zhǔn)使用無熒光空白液(超純水),啟動(dòng)校準(zhǔn)程序后,儀器會(huì)自動(dòng)扣除預(yù)設(shè)的熒光基線值,使零點(diǎn)讀數(shù)穩(wěn)定在 0 鉑鈷單位(PCU)??缍刃?zhǔn)選用中濃度標(biāo)準(zhǔn)色度溶液(如 50PCU),注入比色皿后等待 5 分鐘(確保溫度穩(wěn)定),執(zhí)行校準(zhǔn)程序,儀器將檢測值與標(biāo)準(zhǔn)值對比,自動(dòng)調(diào)整光學(xué)系統(tǒng)增益,同時(shí)疊加熒光補(bǔ)償算法。校準(zhǔn)完成后,需驗(yàn)證校準(zhǔn)曲線線性度,檢測 20PCU、80PCU 標(biāo)準(zhǔn)液,相對偏差需≤±3%,線性相關(guān)系數(shù) R2≥0.999。 熒光補(bǔ)償校準(zhǔn)驗(yàn)證需模擬實(shí)際樣品。使用已知色度值且含熒光成分的驗(yàn)證樣品(如添加熒光劑的 50PCU 標(biāo)準(zhǔn)液),經(jīng)校準(zhǔn)后的儀器檢測值與理論值偏差需≤±4%。若偏差超標(biāo),需重新優(yōu)化熒光截止濾光片組合,或增加熒光發(fā)射波長的檢測通道,通過雙通道數(shù)據(jù)融合(色度吸收光 + 熒光發(fā)射光)提升補(bǔ)償精度。驗(yàn)證過程中需記錄熒光強(qiáng)度與色度檢測值的對應(yīng)關(guān)系,建立干擾修正模型,用于后續(xù)同類樣品檢測。 校準(zhǔn)后參數(shù)固化與維護(hù)需規(guī)范執(zhí)行。完成所有校準(zhǔn)步驟后,在儀器中保存 “熒光樣品模式” 參數(shù)組,包含濾光片組合、熒光補(bǔ)償值、校準(zhǔn)曲線等,下次測量時(shí)直接調(diào)用。每次測量前需檢查熒光空白液狀態(tài),若出現(xiàn)渾濁或熒光強(qiáng)度變化(超過初始值的 5%),需重新配制并校準(zhǔn)。每周用標(biāo)準(zhǔn)色度溶液驗(yàn)證校準(zhǔn)有效性,偏差超過 ±5% 時(shí)需重新執(zhí)行全流程校準(zhǔn)。長期停用后,首次使用需進(jìn)行完整校準(zhǔn),確保熒光補(bǔ)償參數(shù)與光學(xué)系統(tǒng)狀態(tài)匹配。 該校準(zhǔn)方法通過分離熒光干擾信號(hào)與色度檢測信號(hào),實(shí)現(xiàn)熒光樣品的精準(zhǔn)色度測量。關(guān)鍵在于熒光補(bǔ)償參數(shù)的動(dòng)態(tài)適配,需根據(jù)樣品熒光特性調(diào)整校準(zhǔn)頻率,在保證操作規(guī)范性的同時(shí),兼顧檢測效率與數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。校準(zhǔn)記錄需包含熒光參數(shù)、補(bǔ)償值及驗(yàn)證結(jié)果,為后續(xù)數(shù)據(jù)追溯提供依據(jù)。
|